1 目的 為指導(dǎo)和規(guī)范除菌過濾技術(shù)在無菌藥品生產(chǎn)中的應(yīng)用，保證無菌藥品的安全、有效和質(zhì)量穩(wěn)定，依據(jù)《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范(2010年修訂)》及附錄，制定本指南。
 

　　2. 定義
 

　　本指南中的除菌過濾是指采用物理截留的方法去除液體或氣體中的微生物，以達(dá)到無菌藥品相關(guān)質(zhì)量要求的過程。
 

　　3. 范圍
 

　　本指南包括除菌過濾系統(tǒng)的設(shè)計(jì)、選擇、驗(yàn)證、使用等內(nèi)容，適用于無菌藥品從工藝開發(fā)到上市生產(chǎn)的整個(gè)生命周期。
 

　　4 過濾工藝及系統(tǒng)設(shè)計(jì)
 

　　4.1過濾工藝的設(shè)計(jì)
 

　　過濾工藝設(shè)計(jì)時(shí)，應(yīng)根據(jù)待過濾介質(zhì)屬性及工藝目的，選擇合適的過濾器并確定過程參數(shù)。
 

　　除菌過濾工藝應(yīng)根據(jù)工藝目的，選用0.22微米(更小孔徑或相同過濾效力)的除菌級過濾器。0.1微米的除菌級過濾器通常用于支原體的去除。
 

　　對無菌藥品生產(chǎn)的全過程進(jìn)行微生物控制，避免微生物污染。終除菌過濾前，待過濾介質(zhì)的微生物污染水平一般小于等于10cfu/100ml。
 

　　選擇過濾器材質(zhì)時(shí)，應(yīng)充分考察其與待過濾介質(zhì)的兼容性。過濾器不得因與產(chǎn)品發(fā)生反應(yīng)、釋放物質(zhì)或吸附作用而對產(chǎn)品質(zhì)量產(chǎn)生不利影響。除菌過濾器不得脫落纖維，嚴(yán)禁使用含有石棉的過濾器。
 

　　合理的過濾膜面積需要經(jīng)過科學(xué)的方法評估后得出。面積過大可能導(dǎo)致產(chǎn)品收率下降、過濾成本上升；過濾面積過小可能導(dǎo)致過濾時(shí)間延長、中途堵塞甚至產(chǎn)品報(bào)廢。
 

　　應(yīng)注意過濾系統(tǒng)結(jié)構(gòu)的合理性，避免存在衛(wèi)生死角。過濾器進(jìn)出口存在一定的限流作用。應(yīng)根據(jù)工藝需要，選擇合適的進(jìn)出口大小。
 

　　選擇過濾器時(shí)，應(yīng)根據(jù)實(shí)際工藝要求，確定過濾溫度范圍、長過濾時(shí)間、過濾流速、滅菌條件、進(jìn)出口壓差范圍或過濾流速范圍等工藝參數(shù)，并確認(rèn)這些參數(shù)是否在可承受范圍內(nèi)。
 

　　藥品生產(chǎn)企業(yè)在選擇除菌過濾器供應(yīng)商時(shí)，應(yīng)審核供應(yīng)商提供的驗(yàn)證文件和質(zhì)量證書，確保選擇的過濾器是除菌級過濾器。藥品生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)將除菌過濾器廠家作為供應(yīng)商進(jìn)行管理，例如進(jìn)行文件審計(jì)或工廠現(xiàn)場審計(jì)、質(zhì)量協(xié)議和產(chǎn)品變更控制協(xié)議的簽訂等。
 

　　4.2過濾系統(tǒng)的設(shè)計(jì)
 

　　在設(shè)計(jì)除菌過濾系統(tǒng)時(shí)，應(yīng)充分認(rèn)識除菌過濾工藝的局限性。由于除菌過濾器不能將病毒或支原體全部濾除，可采用熱處理等方法來彌補(bǔ)除菌過濾的不足。
 

　　盡可能采取措施降低過濾除菌的風(fēng)險(xiǎn)，例如宜安裝第二只已滅菌的除菌過濾器，終的除菌過濾濾器應(yīng)當(dāng)盡可能接近灌裝點(diǎn)。通常通過兩個(gè)或以上相同或遞減孔徑的過濾方式，統(tǒng)稱為序列過濾。序列過濾系統(tǒng)中，如果在終除菌過濾器前增加一個(gè)除菌級過濾器，并且確保兩個(gè)過濾器之間無菌，以及控制過濾前介質(zhì)的微生物污染水平一般小于等于10cfu/100ml，這種情況下稱為冗余過濾系統(tǒng)。冗余過濾系統(tǒng)中，接近灌裝點(diǎn)的過濾器稱為主過濾器，其前端的過濾器則稱為冗余過濾器。冗余過濾系統(tǒng)使用后，如果主過濾器完整性測試通過，則冗余過濾器不需要進(jìn)行完整性測試；如果主過濾器完整性測試失敗，冗余過濾器必須通過完整性測試。另一種序列過濾系統(tǒng)是指在過濾工藝中經(jīng)過驗(yàn)證需要一系列(兩個(gè)或以上)的除菌級過濾器才能達(dá)到除菌效果的系統(tǒng)，那么這一系列的過濾器被認(rèn)為是一個(gè)除菌單元，在使用后必須全部通過完整性測試。
 

　　過濾器位置設(shè)計(jì)時(shí)應(yīng)該考慮有菌氣體或液體的釋放，并且根據(jù)產(chǎn)品批量、管路長短、安裝和滅菌方便性等，確認(rèn)過濾器安裝的區(qū)域和位置。
 

　　過濾系統(tǒng)設(shè)計(jì)時(shí)，應(yīng)考慮過濾器完整性測試的方便性及其給系統(tǒng)帶來的微生物污染風(fēng)險(xiǎn)。過濾器滅菌后，接觸其下游系統(tǒng)的氣體和沖洗液體必須是無菌的。
 

　　除菌過濾系統(tǒng)設(shè)計(jì)時(shí)，應(yīng)充分考慮系統(tǒng)滅菌的安全性和方便性。使用在線滅菌方式時(shí)，應(yīng)考慮系統(tǒng)內(nèi)冷空氣及冷凝水的排放問題，從而保證系統(tǒng)溫度低點(diǎn)也能達(dá)到預(yù)期的F0值。采用離線方法滅菌時(shí)，應(yīng)充分考慮轉(zhuǎn)移和安裝過程的風(fēng)險(xiǎn)。例如：應(yīng)注意氣流方向，操作人員的無菌操作過程，以及可考慮無菌連接器等連接方案。
 

　　若采用一次性過濾系統(tǒng)且需進(jìn)行使用前完整性測試或預(yù)沖洗，在設(shè)計(jì)時(shí)需額外考慮如下因素：上游連接管路的耐壓性、下游的無菌性、下游能提供足夠的空間(比如安裝除菌級屏障過濾器或相應(yīng)體積的無菌袋)進(jìn)行排氣排水。如果使用一次性無菌連接裝置，應(yīng)有文件證明不會有微生物進(jìn)入污染的風(fēng)險(xiǎn)。
 

　　5. 除菌過濾驗(yàn)證
 

　　5.1除菌過濾驗(yàn)證概述
 

　　本指南所述的除菌過濾驗(yàn)證包含除菌過濾器本身的性能確認(rèn)和過濾工藝驗(yàn)證兩部分。除菌過濾器性能確認(rèn)和過濾工藝驗(yàn)證，兩者很難互相替代，應(yīng)獨(dú)立完成。
 

　　除菌過濾器本身的性能確認(rèn)一般由過濾器生產(chǎn)商完成，主要的確認(rèn)項(xiàng)目包括微生物截留測試、完整性測試、生物安全測試(毒性測試和內(nèi)毒素測試)、流速測試、水壓測試、多次滅菌測試、可提取物測試、顆粒物釋放測試和纖維脫落測試等。
 

　　過濾工藝驗(yàn)證是指針對具體的待過濾介質(zhì)，結(jié)合特定的工藝條件而實(shí)施的驗(yàn)證過程，一般包括細(xì)菌截留試驗(yàn)、化學(xué)兼容性試驗(yàn)、可提取物或浸出物試驗(yàn)、安全性評估和吸附評估等內(nèi)容。如果過濾后，以產(chǎn)品作為潤濕介質(zhì)進(jìn)行完整性測試，還應(yīng)進(jìn)行相關(guān)的產(chǎn)品完整性測試驗(yàn)證。除菌過濾工藝驗(yàn)證可以由過濾器的使用者或委托試驗(yàn)檢測機(jī)構(gòu)(例如：過濾器的生產(chǎn)者或第三方試驗(yàn)室)完成，但過濾器使用者應(yīng)終保證實(shí)際生產(chǎn)過程中操作參數(shù)和允許的極值在驗(yàn)證時(shí)已被覆蓋，并有相應(yīng)證明文件。
 

　　不同過濾器生產(chǎn)商的驗(yàn)證文件一般是不能相互替代的，同一生產(chǎn)商的同一材質(zhì)的除菌過濾驗(yàn)證文件往往也不能直接互換，除非有合理的聲明或文件支持。如果在生產(chǎn)過程中有兩個(gè)或以上不同生產(chǎn)商提供同一材質(zhì)或者不同材質(zhì)的過濾器，或同一生產(chǎn)商的同一材質(zhì)(不同的成膜工藝)的過濾器，驗(yàn)證應(yīng)該分別進(jìn)行。
 

　　5.2細(xì)菌截留試驗(yàn)
 

　　細(xì)菌截留試驗(yàn)的研究目的是模擬實(shí)際生產(chǎn)過濾工藝中的差條件，過濾含有一定量挑戰(zhàn)微生物的產(chǎn)品溶液或者產(chǎn)品替代溶液，以確認(rèn)除菌過濾器的微生物截留能力。
 

　　缺陷型假單胞菌(直徑大約為0.3—0.4微米，長度0.6—1.0微米，必須是單一的、分散的細(xì)胞)，是除菌過濾驗(yàn)證中細(xì)菌截留試驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)挑戰(zhàn)微生物。在有些情況下，缺陷型假單胞菌不能代表差條件，則需要考慮采用其他細(xì)菌。如果使用其他細(xì)菌，應(yīng)保證該細(xì)菌足夠細(xì)小，以挑戰(zhàn)除菌級過濾器的截留性能，并能代表產(chǎn)品及生產(chǎn)過程中發(fā)現(xiàn)的小微生物。
 

　　在除菌過濾驗(yàn)證中使用濾膜還是濾器，取決于驗(yàn)證的目的。如果微生物截留試驗(yàn)的目的是驗(yàn)證過濾工藝中特定膜材的細(xì)菌截留效能，那么使用濾膜是能滿足需要的。微生物截留試驗(yàn)中所用的濾膜必須和實(shí)際生產(chǎn)中所用過濾器材質(zhì)*相同，并應(yīng)包括多個(gè)批次(通常三個(gè)批次)。其中至少應(yīng)有一個(gè)批次為低起泡點(diǎn)(低規(guī)格)濾膜。為了在微生物挑戰(zhàn)試驗(yàn)中實(shí)施差條件，一般需要使用完整性測試的數(shù)值非常接近過濾器生產(chǎn)商提供的濾器完整性限值的濾膜(例如不高于標(biāo)準(zhǔn)完整性限值的110%)。如果在驗(yàn)證中沒有使用低起泡點(diǎn)濾膜，那么在實(shí)際生產(chǎn)中所使用的標(biāo)準(zhǔn)溶液濾膜/芯起泡點(diǎn)值，必須高于驗(yàn)證試驗(yàn)中實(shí)際使用的濾膜的小起泡點(diǎn)值。
 

　　微生物截留試驗(yàn)應(yīng)選擇0.45微米孔徑的濾膜作為每個(gè)試驗(yàn)的陽性對照。挑戰(zhàn)微生物的尺寸需要能夠穿透過0.45微米的濾膜，以證明它培養(yǎng)到合適的大小和濃度。三個(gè)不同批號的0.22微米(或0.2微米)測試濾膜和0.45微米的對照濾膜都需在一個(gè)試驗(yàn)系統(tǒng)中平行在線進(jìn)行挑戰(zhàn)試驗(yàn)。
 

　　應(yīng)盡可能將挑戰(zhàn)微生物直接接種在藥品中進(jìn)行細(xì)菌挑戰(zhàn)。但是藥品和/或工藝條件本身可能會影響挑戰(zhàn)微生物的存活力，因此在進(jìn)行細(xì)菌截留實(shí)驗(yàn)之前，需要確認(rèn)挑戰(zhàn)微生物于工藝條件下在藥品中的存活情況，以確定合理的細(xì)菌挑戰(zhàn)方法，也即活度實(shí)驗(yàn)(生存性實(shí)驗(yàn))。如果使用替代溶液進(jìn)行試驗(yàn)，需要提供合理的數(shù)據(jù)和解釋。對于同一族產(chǎn)品，即具有相同組分而不同濃度的產(chǎn)品，可以用挑戰(zhàn)極限濃度的方法進(jìn)行驗(yàn)證。過濾溫度、過濾時(shí)間、過濾批量和壓差或流速會影響細(xì)菌截留試驗(yàn)的結(jié)果。
 

　　5.3可提取物和浸出物試驗(yàn)
 

　　浸出物存在于終原料藥和藥品中，通常包含在可提取物內(nèi)，但由于分離和檢測方法的限制以及浸出物的量極小，很難被定量或定性。應(yīng)先獲得差條件下的可提取物數(shù)據(jù)，將其用于藥品的安全性評估?？商崛∥锓从沉私鑫锏拇罂赡?，無論是否要做浸出物試驗(yàn)，可提取物的測試和評估都非常重要。
 

　　可提取物試驗(yàn)在選擇模型溶劑之前必須對產(chǎn)品(藥品)處方進(jìn)行全面的評估。用于測試的模型溶劑應(yīng)能夠模擬實(shí)際的藥品處方，同時(shí)與過濾器不應(yīng)有化學(xué)兼容性方面的問題。通常應(yīng)具有與產(chǎn)品相同或相似的理化性質(zhì)，如pH值、極性或離子強(qiáng)度等。如果使用了模型溶劑或幾種溶液合并的方式，則必須提供溶液選擇的合理依據(jù)。
 

　　可提取物試驗(yàn)可以用靜態(tài)浸泡或循環(huán)流動的方法，其影響因素包括滅菌方法、沖洗、過濾流體的化學(xué)性質(zhì)、工藝時(shí)間、工藝溫度、過濾量與過濾膜面積之比等。使用長過濾時(shí)間、高過濾溫度、多次蒸汽滅菌循環(huán)、增加伽瑪輻射的次數(shù)和劑量都可能會增加可提取物水平。可提取物試驗(yàn)應(yīng)使用滅菌后的濾器來完成。用于試驗(yàn)的過濾器盡量不進(jìn)行預(yù)沖洗。
 

　　可提取物和浸出物的檢測方法包括定量和定性兩類。如非揮發(fā)性殘留物(NVR)、紫外光譜、反相高效液相色譜法(RP-HPLC)、傅立葉變換紅外光譜法(FTIR)、氣相色譜-質(zhì)譜(GC-MS)、液相色譜-質(zhì)譜(LC-MS)、總有機(jī)碳分析(TOC)等。為了保證分析方法的可靠性，需對分析方法進(jìn)行驗(yàn)證或確認(rèn)。選擇哪幾種分析方法，取決于實(shí)際的藥品和生產(chǎn)工藝以及過濾器生產(chǎn)商對過濾器的充分研究。
 

　　在完成可提取物或者浸出物試驗(yàn)后，應(yīng)針對過濾器可提取物或浸出物的種類和含量，結(jié)合藥品終劑型中的濃度、劑量大小、給藥時(shí)間、給藥途徑等對結(jié)果進(jìn)行安全性評估，以評估可提取物和浸出物是否存在安全性風(fēng)險(xiǎn)。
 

　　5.4化學(xué)兼容性試驗(yàn)
 

　　化學(xué)兼容性試驗(yàn)用來評估在特定工藝條件下，待過濾介質(zhì)對過濾裝置的化學(xué)影響。
 

　　化學(xué)兼容性試驗(yàn)應(yīng)涵蓋整個(gè)過濾裝置，不只是濾膜。試驗(yàn)的設(shè)計(jì)應(yīng)考慮待過濾介質(zhì)性質(zhì)、過濾溫度和接觸時(shí)間等。試驗(yàn)過程中的過濾時(shí)間應(yīng)達(dá)到或者超過實(shí)際生產(chǎn)過程的長工藝時(shí)間，過濾溫度應(yīng)達(dá)到或者超過生產(chǎn)過程的高溫度。
 

　　化學(xué)兼容性試驗(yàn)檢測項(xiàng)目一般包括：過濾器接觸待過濾介質(zhì)前后的目視檢查；過濾過程中流速變化；濾膜重量/厚度的變化；過濾前后起泡點(diǎn)等完整性測試數(shù)值的變化；濾膜拉伸強(qiáng)度的變化；濾膜電鏡掃描確認(rèn)等。應(yīng)基于對濾膜和濾器材料的充分了解，綜合選擇上述多種檢測方法。
 

　　5.5吸附試驗(yàn)
 

　　待過濾介質(zhì)中的某些成分粘附在濾器上的過程，可能影響待過濾介質(zhì)的組成和濃度。過濾器中吸附性的材料包括濾膜、外殼和支撐性材料。流速、過濾時(shí)間、待過濾介質(zhì)濃度、防腐劑濃度、溫度和pH值等因素都可能影響吸附效果。
 

　　5.6基于產(chǎn)品完整性試驗(yàn)
 

　　應(yīng)明確過濾器使用后完整性測試的潤濕介質(zhì)。如果采用的潤濕介質(zhì)為藥液，則應(yīng)進(jìn)行產(chǎn)品相關(guān)完整性標(biāo)準(zhǔn)的驗(yàn)證以支持該標(biāo)準(zhǔn)的確定。實(shí)驗(yàn)室規(guī)模下按比例縮小的研究是產(chǎn)品完整性試驗(yàn)的一部分。第二部分是在實(shí)際工藝條件下定期監(jiān)測產(chǎn)品起泡點(diǎn)或者產(chǎn)品擴(kuò)散流的趨勢，作為驗(yàn)證的一部分。
 

　　5.7再驗(yàn)證
 

　　完成過濾工藝的驗(yàn)證之后，還應(yīng)當(dāng)定期評估產(chǎn)品性質(zhì)和工藝條件，以確定是否需要進(jìn)行再驗(yàn)證。產(chǎn)品、過濾器、工藝參數(shù)等變量中任何一個(gè)發(fā)生改變，均需要評估是否需要再驗(yàn)證。至少(但不限于)對以下內(nèi)容進(jìn)行評估，以決定是否需要開展再驗(yàn)證：
 

　　單位面積的流速高于已驗(yàn)證的流速
 

　　過濾壓差超過被驗(yàn)證壓差
 

　　過濾時(shí)間超過被驗(yàn)證的時(shí)間
 

　　過濾面積不變的情況下提高過濾量
 

　　過濾溫度變化
 

　　產(chǎn)品處方改變
 

　　過濾器滅菌條件或者滅菌方式改變
 

　　過濾器生產(chǎn)商改變，過濾器生產(chǎn)工藝的變更，或者過濾器的膜材或結(jié)構(gòu)性組成發(fā)生改變
 

　　5.8氣體過濾驗(yàn)證
 

　　除了上述液體除菌過濾的驗(yàn)證，對于氣體過濾的驗(yàn)證，過濾器使用者應(yīng)首先評估過濾器生產(chǎn)商的驗(yàn)證文件是否已經(jīng)能覆蓋實(shí)際生產(chǎn)中的不同應(yīng)用。應(yīng)對氣體過濾器的使用壽命以及更換頻率進(jìn)行評估。評估應(yīng)從以下幾個(gè)方面考慮：過濾器完整性、外觀、滅菌次數(shù)、工作的溫度、使用點(diǎn)等。
 

　　5.9一次性過濾系統(tǒng)驗(yàn)證
 

　　一次性過濾系統(tǒng)除過濾器外，通常還包含其他組件。在驗(yàn)證時(shí)應(yīng)充分考慮其他組件對工藝和產(chǎn)品的安全性及有效性的影響。
 

　　6. 除菌過濾器、系統(tǒng)的使用
 

　　6.1使用
 

　　過濾器安放位置應(yīng)便于其安裝、拆卸、檢測等操作并且不能影響其使用功能。過濾器與支撐過濾器的設(shè)備、地面、墻面等連接應(yīng)牢固可靠。過濾器各部件間應(yīng)接合緊密，密封良好，能夠耐受生產(chǎn)操作壓力，且無泄漏、變形。濾器、濾膜安裝前應(yīng)確認(rèn)其規(guī)格、型號、外觀符合要求。組裝過程中，應(yīng)盡量避免污染。應(yīng)按照濾器的使用說明進(jìn)行安裝。如果現(xiàn)場有多種規(guī)格濾器時(shí)，應(yīng)有第二人對濾器信息進(jìn)行復(fù)核確認(rèn)，復(fù)核應(yīng)有記錄。
 

　　為了減少濾器產(chǎn)生的顆粒及其他異物影響產(chǎn)品，可對安裝好的除菌過濾系統(tǒng)進(jìn)行必要的預(yù)沖洗。應(yīng)結(jié)合供應(yīng)商提供的方法進(jìn)行沖洗。沖洗方法應(yīng)經(jīng)過驗(yàn)證。在正常操作時(shí)，沖洗量應(yīng)不低于驗(yàn)證的低沖洗量。沖洗后應(yīng)采用適當(dāng)方法排除沖洗液。
 

　　除菌過濾系統(tǒng)應(yīng)進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評估，盡量進(jìn)行密閉性確認(rèn)。過濾器上游系統(tǒng)密閉性可通過壓力保持和在線完整性測試等方式確認(rèn)。過濾器下游密閉性可通過壓力保持進(jìn)行確認(rèn)，相關(guān)參數(shù)應(yīng)經(jīng)過驗(yàn)證。
 

　　除菌過濾應(yīng)在規(guī)定的工藝控制參數(shù)范圍內(nèi)進(jìn)行，為保證除菌過濾的有效性，應(yīng)對影響除菌過濾效果的關(guān)鍵參數(shù)進(jìn)行控制和記錄。控制項(xiàng)目應(yīng)包括除菌過濾溫度、時(shí)間、壓力、上下游壓差等；系統(tǒng)的滅菌參數(shù)、無菌接收容器的滅菌參數(shù)；以及過濾器完整性測試結(jié)果等。
 

　　除了過程參數(shù)，還應(yīng)對濾器的關(guān)鍵信息進(jìn)行記錄(如：貨號、批號和序列號，或其他識別號)，以利追溯。
 

　　應(yīng)制定企業(yè)的培訓(xùn)計(jì)劃，除菌過濾器的相關(guān)培訓(xùn)應(yīng)納入培訓(xùn)計(jì)劃中。培訓(xùn)內(nèi)容包括理論知識及操作技能。理論知識培訓(xùn)包括濾器生產(chǎn)商提供的使用說明、工作原理、相關(guān)參數(shù)及濾芯、過濾系統(tǒng)相關(guān)驗(yàn)證要求；操作技能培訓(xùn)包括相關(guān)濾芯使用的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程，如完整性測試培訓(xùn)、清洗滅菌、干燥、保存等操作培訓(xùn)、產(chǎn)品除菌過濾工藝培訓(xùn)、系統(tǒng)密閉性測試培訓(xùn)等。應(yīng)對人員進(jìn)行理論和實(shí)際操作考核，考核合格后上崗。當(dāng)系統(tǒng)或參數(shù)發(fā)生變更，相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程內(nèi)容修訂后，應(yīng)對人員進(jìn)行再培訓(xùn)。
 

　　除菌過濾工藝過程發(fā)生偏差時(shí)，應(yīng)進(jìn)行深入的調(diào)查，以找到根本原因并采取糾偏措施。對發(fā)生偏差的產(chǎn)品應(yīng)進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評估。
 

　　6.2滅菌
 

　　使用前，除菌過濾器必須經(jīng)過滅菌處理(如在線或離線蒸汽滅菌，輻射滅菌等)。在線蒸汽滅菌的設(shè)計(jì)及操作過程應(yīng)重點(diǎn)考慮濾芯可耐受的高壓差及溫度。滅菌開始前應(yīng)從濾器及管道設(shè)備中排出系統(tǒng)內(nèi)的非冷凝氣體和冷凝水。滅菌過程中，過濾系統(tǒng)內(nèi)部冷點(diǎn)應(yīng)達(dá)到設(shè)定的滅菌溫度。在整個(gè)滅菌過程中，濾芯上下游壓差不能超過濾芯在特定溫度下可承受的大壓差。滅菌完成后，可引入潔凈的空氣或其他適合氣體來對系統(tǒng)進(jìn)行降溫。降溫時(shí)應(yīng)維持一定的正向壓力以保持系統(tǒng)的無菌狀態(tài)。
 

　　使用滅菌器進(jìn)行滅菌時(shí)，通常采用脈動真空滅菌方法。滅菌過程應(yīng)保證濾器能被蒸汽穿透，從而對過濾器進(jìn)行*滅菌。不論采用濾芯加不銹鋼套筒還是囊式濾器的形式，濾器的進(jìn)口端和出口端都應(yīng)能透過蒸汽。應(yīng)參考濾器生產(chǎn)商提供的滅菌參數(shù)進(jìn)行滅菌。溫度過高可能導(dǎo)致過濾器上的高分子聚合物材質(zhì)性質(zhì)不穩(wěn)定，并可能影響濾器的物理完整性或增高可提取物水平。
 

　　除菌過濾中可能會用到濾器、一次性袋子、軟管等裝置，這些物品可采用輻射滅菌的方式進(jìn)行滅菌。已被輻射滅菌過的過濾器、袋子及軟管等，由于累積劑量效應(yīng)的緣故，通常不應(yīng)被多次滅菌。如果再加以蒸汽滅菌，則可能增加可提取物水平，除非對除菌過濾器的輻照和蒸汽重復(fù)滅菌進(jìn)行了驗(yàn)證。
 

　　罐體呼吸器采用在線蒸汽進(jìn)行滅菌時(shí)，可采用反向進(jìn)蒸汽的方式，即蒸汽直接引入罐體，然后從呼吸器濾芯下游穿過濾芯，從上游排出。但應(yīng)控制濾芯滅菌時(shí)的反向壓差。此壓差應(yīng)保持在濾芯可耐受壓差范圍之內(nèi)。反向滅菌時(shí)建議使用帶有卡入式接口的濾芯，不建議采用直插式濾芯。
 

　　6.3完整性測試
 

　　除菌過濾器使用后，必須采用適當(dāng)?shù)姆椒⒓磳ζ渫暾赃M(jìn)行測試并記錄。除菌過濾器使用前，應(yīng)當(dāng)進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評估來確定是否進(jìn)行完整性測試，并確定在滅菌前還是滅菌后進(jìn)行。當(dāng)進(jìn)行滅菌后-使用前完整性測試時(shí)，需要采取措施保證過濾器下游的無菌性。常用的完整性測試方法有起泡點(diǎn)測試、擴(kuò)散流/前進(jìn)流試驗(yàn)或水侵入法測試。
 

　　進(jìn)入*和B級潔凈區(qū)的消毒劑，應(yīng)經(jīng)除菌過濾或采用其他適當(dāng)方法除菌。如果使用過濾方法除菌，應(yīng)評估消毒劑與所選擇濾器材質(zhì)之間的適用性。濾器使用后需進(jìn)行完整性測試。
 

　　用于直接接觸無菌藥液或無菌設(shè)備表面的氣體的過濾器，應(yīng)在每批或多批次連續(xù)生產(chǎn)結(jié)束后對其進(jìn)行完整性測試。對于其他的應(yīng)用，可以根據(jù)風(fēng)險(xiǎn)評估的結(jié)果，制定完整性測試的頻率。氣體過濾器的完整性測試，可以使用低表面張力的液體潤濕，進(jìn)行起泡點(diǎn)或者擴(kuò)散流/前進(jìn)流的測試；也可以使用水侵入法測試。水侵入法可作為優(yōu)先選擇。
 

　　對于冗余過濾，使用后應(yīng)先對主過濾器進(jìn)行完整性測試，如果主過濾器完整性測試通過，則冗余過濾器不需要進(jìn)行完整性測試；如果主過濾器完整性測試失敗，則需要對冗余過濾器進(jìn)行完整性測試。冗余過濾器完整性測試結(jié)果可作為產(chǎn)品放行的依據(jù)。除菌過濾器使用前，應(yīng)通過風(fēng)險(xiǎn)評估的方式確定是否進(jìn)行完整性測試，以及測試哪一級過濾器或者兩級過濾器都要進(jìn)行檢測，并確定在過濾器滅菌前還是滅菌后進(jìn)行。滅菌后的檢測，應(yīng)考慮確保兩級過濾器之間的無菌性。
 

　　可根據(jù)工藝需要和實(shí)際條件，決定采用在線完整性測試或者離線完整性測試。但應(yīng)注意，完整性測試是檢測整個(gè)過濾系統(tǒng)的完整性，而非僅針對過濾器本身。在線測試能更好地保證上下游連接的完整性。當(dāng)無法滿足在線測試條件時(shí)，可選擇進(jìn)行離線完整性測試。此時(shí)應(yīng)將過濾器保持在套筒中整體拆卸，并直接進(jìn)行測試，不應(yīng)將濾芯從不銹鋼套筒拆卸單獨(dú)測試。
 

　　考慮到完整性測試結(jié)果的客觀性以及數(shù)據(jù)可靠性，應(yīng)盡可能在關(guān)鍵使用點(diǎn)使用自動化完整性測試儀。自動化完整性測試儀應(yīng)在使用前，進(jìn)行安裝確認(rèn)、運(yùn)行確認(rèn)和性能確認(rèn)。應(yīng)建立該設(shè)備使用、清潔和維護(hù)的操作規(guī)程，以及定期的預(yù)防性維護(hù)計(jì)劃(其中應(yīng)當(dāng)包含設(shè)備的定期校驗(yàn)要求)。
 

　　對于標(biāo)準(zhǔn)介質(zhì)(水或者某些醇類)潤濕的除菌過濾器完整性測試，其參數(shù)的設(shè)定應(yīng)以過濾器生產(chǎn)廠家提供的參數(shù)為標(biāo)準(zhǔn)，且該參數(shù)必須經(jīng)過過濾器生產(chǎn)廠家驗(yàn)證，證明其與細(xì)菌截留結(jié)果相關(guān)聯(lián)。通常該參數(shù)可在過濾器的質(zhì)量證書上獲得。
 

　　如果實(shí)際工藝中，需要用非標(biāo)準(zhǔn)介質(zhì)(通常為實(shí)際產(chǎn)品)潤濕，進(jìn)行除菌過濾器完整性測試，則完整性測試限值，如產(chǎn)品起泡點(diǎn)或者產(chǎn)品擴(kuò)散流標(biāo)準(zhǔn)，必須通過實(shí)際產(chǎn)品作為潤濕介質(zhì)進(jìn)行的驗(yàn)證獲得。
 

　　應(yīng)建立完整性測試的標(biāo)準(zhǔn)操作程序，包括測試方法、測試參數(shù)的設(shè)定、潤濕液體的性質(zhì)和溫度、潤濕的操作流程(如壓力、時(shí)間和流速范圍)、測試的氣體、數(shù)據(jù)的記錄要求等內(nèi)容。
 

　　對完整性測試結(jié)果的判定，不應(yīng)該直接看“通過/不通過”，應(yīng)該對測試結(jié)果的具體數(shù)值或者自動完整性測試儀報(bào)告中的過程數(shù)據(jù)進(jìn)行完整記錄并審核。
 

　　如果完整性測試失敗，需記錄并進(jìn)行調(diào)查?？煽紤]的影響因素有：潤濕不充分、產(chǎn)品殘留、過濾器安裝不正確、系統(tǒng)泄漏、不正確的過濾器、自動化程序設(shè)置錯誤和測試設(shè)備問題等。再測試時(shí)，應(yīng)根據(jù)分析結(jié)果采取以下措施，如加強(qiáng)潤濕條件、加強(qiáng)清洗條件、用低表面張力液體如醇類進(jìn)行潤濕，檢測系統(tǒng)密閉性、核對過濾器的型號是否正確、檢查自動化程序設(shè)置和檢查設(shè)備等。再測試的過程和結(jié)果都應(yīng)當(dāng)有完備的文件記錄。
 

　　6.4重復(fù)使用
 

　　液體除菌過濾器在設(shè)計(jì)和制造時(shí)，一般只考慮了在單一批次中的使用情況，或者在多批次連續(xù)生產(chǎn)周期內(nèi)使用的情形。但是在實(shí)際工作中，有時(shí)過濾器被使用在多批次、同一產(chǎn)品的生產(chǎn)工藝中。一般認(rèn)為“液體除菌級過濾器的重復(fù)使用”可以定義為：用于同一液體產(chǎn)品的多批次過濾。以下情況都屬于液體過濾器重復(fù)使用情況：
 

　　(1)批次間進(jìn)行沖洗
 

　　(2)批次間沖洗和滅菌
 

　　(3)批次間沖洗、清洗和滅菌
 

　　在充分了解產(chǎn)品和工藝風(fēng)險(xiǎn)的基礎(chǔ)上，采用風(fēng)險(xiǎn)評估的方式，對能否反復(fù)使用過濾器進(jìn)行評價(jià)。風(fēng)險(xiǎn)因素包括：細(xì)菌的穿透、過濾器完整性缺陷、可提取物的增加、清洗方法對產(chǎn)品內(nèi)各組分清洗的適用性、產(chǎn)品存在的殘留(或組分經(jīng)滅菌后的衍生物)對下一批次產(chǎn)品質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)的影響、過濾器過早堵塞、過濾器組件老化引起的性能改變等。評估應(yīng)考慮個(gè)體化差異，提供充分的驗(yàn)證和數(shù)據(jù)支持，在使用過程中應(yīng)持續(xù)監(jiān)測。
 

　　6.5氣體過濾器特殊考慮因素
 

　　由于濾膜的疏水性，氣體過濾器可使氣體自由通過。但由于系統(tǒng)或環(huán)境溫度變化而產(chǎn)生的冷凝水則可能會導(dǎo)致氣體過濾不暢，嚴(yán)重時(shí)會導(dǎo)致系統(tǒng)或?yàn)V器損壞。如有必要，應(yīng)在過濾管線上的合理位置安裝冷凝水排放裝置。對于罐體呼吸用過濾器，應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況決定是否安裝加熱套，以保證氣體順利通過濾芯。
 

　　6.6一次性過濾系統(tǒng)
 

　　因?yàn)橐淮涡赃^濾系統(tǒng)預(yù)滅菌的特殊性，在拆包裝時(shí)需要確認(rèn)：外包裝是否完好；產(chǎn)品仍在有效期內(nèi)；包裝上具有預(yù)滅菌標(biāo)簽且能判斷已經(jīng)過預(yù)滅菌處理；以及組件正確性；是否破損、明顯的異源物質(zhì)等。
 

　　安裝時(shí)需注意不能破壞系統(tǒng)下游的無菌性，鼓勵采用無菌連接器以降低風(fēng)險(xiǎn)。
 

　　在決定一次性過濾系統(tǒng)使用前是否進(jìn)行完整性測試時(shí)，應(yīng)基于以下因素進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評估(但不局限于以下因素)：
 

　　評估過濾器完整性失敗的影響，包括將非無菌產(chǎn)品引入無菌區(qū)域的可能性
 

　　評估額外增加的組件和操作引入污染的風(fēng)險(xiǎn)
 

　　檢測到潛在破損的可能性
 

　　進(jìn)行使用前-滅菌后完整性測試時(shí)，破壞過濾器下游無菌的可能性
 

　　潤濕液體是否會稀釋產(chǎn)品或影響產(chǎn)品質(zhì)量屬性
 

　　額外增加的時(shí)間對于時(shí)間敏感型工藝的影響
 

　　7. 減菌過濾工藝
 

　　相對于除菌過濾，減菌過濾是通過過濾的方法將待過濾介質(zhì)中的微生物污染水平下降到可接受程度的過濾工藝。
 

　　減菌過濾通常設(shè)計(jì)在：終端滅菌工藝生產(chǎn)的無菌制劑的灌裝前端，或非終滅菌工藝生產(chǎn)的無菌制劑的除菌過濾工序前端。減菌過濾的目的是使產(chǎn)品終滅菌前或除菌過濾前的微生物污染水平符合預(yù)期。
 

　　減菌過濾系統(tǒng)應(yīng)采用孔徑0.45微米或0.22(或以下)微米的過濾器，以獲得可接受的微生物污染水平。過濾系統(tǒng)的設(shè)計(jì)應(yīng)以工藝參數(shù)和結(jié)果可控為目標(biāo)，綜合考慮：過濾器的尺寸、過濾藥液量、過濾時(shí)間、過濾壓差、藥液的接收和儲存的方式和時(shí)間等要素。由于過濾前后的藥液是非無菌的，設(shè)計(jì)時(shí)應(yīng)注意藥液中微生物污染水平的變化。
 

　　應(yīng)通過驗(yàn)證來確認(rèn)減菌過濾器不會對藥液產(chǎn)生負(fù)面影響。減菌過濾工藝的驗(yàn)證可作為產(chǎn)品工藝驗(yàn)證的一部分。
 

　　減菌過濾的正常運(yùn)行是保證產(chǎn)品終滅菌前(或除菌過濾前)的微生物污染水平符合可接受程度的重要措施。減菌過濾工藝驗(yàn)證應(yīng)包括化學(xué)兼容性，可提取物/浸出物及吸附等。應(yīng)建立相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程來規(guī)范過濾器的使用，如安裝、系統(tǒng)連接、消毒或滅菌、完整性測試等操作；應(yīng)制定減菌過濾工藝的關(guān)鍵工藝參數(shù)，如過濾壓差，過濾時(shí)間等。
 

　　重復(fù)使用過濾器濾芯時(shí)，也應(yīng)進(jìn)行清洗效果，多滅菌(或消毒)次數(shù)等驗(yàn)證等。重復(fù)使用濾芯應(yīng)對待過濾介質(zhì)無不良影響，不增加產(chǎn)品污染和交叉污染的風(fēng)險(xiǎn)。重復(fù)使用的濾芯不得用于不同種類的產(chǎn)品，應(yīng)制定標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程管理重復(fù)使用濾芯的清洗、滅菌、儲存、標(biāo)識等重要事項(xiàng)。
 

　　8. 術(shù)語解釋
 

　　(1)微生物污染水平：存在于原料、原料藥起始物料、中間體或原料藥中微生物的種類及數(shù)量。
 

　　(2)吸附：待過濾介質(zhì)中的某些成分粘附在濾膜(或?yàn)V器)上的過程，可能影響待過濾介質(zhì)的成分和濃度。
 

　　(3)除菌過濾器：根據(jù)ASTM 838-15，用挑戰(zhàn)水平大于等于1×107cfu/cm2有效過濾面積的缺陷型假單胞菌對過濾器進(jìn)行挑戰(zhàn)，經(jīng)過適當(dāng)驗(yàn)證，可以穩(wěn)定重現(xiàn)產(chǎn)生無菌濾出液的過濾器。
 

　　(4)有效過濾面積：可用于過濾工藝介質(zhì)的過濾器總表面積。
 

　　(5)冗余過濾：為降低除菌過濾的風(fēng)險(xiǎn)而采用的一種多級過濾系統(tǒng)。即在終除菌過濾器之前安裝一級已滅菌的除菌級過濾器，并保證這兩級過濾器之間的無菌性。在冗余過濾系統(tǒng)中，靠近終灌裝點(diǎn)的一級一般稱為主過濾器。前面一級稱為冗余過濾器。在符合冗余過濾的條件下，當(dāng)主過濾器完整性測試失敗時(shí)，冗余過濾器通過測試，產(chǎn)品仍可以接受。
 

　　(6)序列過濾：通過兩個(gè)或以上相同或遞減孔徑的過濾方式。
 

　　(7)完整性測試：與過濾器/過濾裝置的細(xì)菌截留能力相關(guān)的一種非破壞性物理測試。
 

　　(8)無菌連接：在非無菌環(huán)境下連接兩個(gè)或多個(gè)獨(dú)立的系統(tǒng)而不破壞系統(tǒng)無菌性的連接方式。
 

　　(9)屏障過濾器：同時(shí)含有疏水性和親水性濾膜，可同時(shí)過濾氣體和液體的過濾器。
 

　　(10)化學(xué)兼容性試驗(yàn)：過濾器與被過濾介質(zhì)之間有無不良的反應(yīng)和相互作用的測試。
 

　　(11)一次性過濾系統(tǒng)：一種過濾工藝設(shè)備解決方案，通常由聚合材料組件裝配而成，形成一個(gè)完整的過濾系統(tǒng)，用于單次或一個(gè)階段性生產(chǎn)活動，單次使用后即拋棄。
 

　　(12)可提取物：在特殊條件下(例如有機(jī)溶劑、特別高溫、離子強(qiáng)度、pH、接觸時(shí)間等)，可以從過濾器及其他組件材料的工藝介質(zhì)接觸表面提取出的化學(xué)物質(zhì)?？商崛∥锬軌虮碚鞔蟛糠?但并非全部)在工藝介質(zhì)中可能的潛在浸出物。
 

　　(13)差條件：導(dǎo)致工藝及產(chǎn)品失敗的概率高于正常工藝的條件或狀態(tài)，即標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程范圍以內(nèi)工藝的上限和下限。但這類差條件不一定必然導(dǎo)致產(chǎn)品或工藝的不合格。
 

　　(14)浸出物：在存儲或常規(guī)工藝條件下，從接觸產(chǎn)品或非接觸產(chǎn)品的材料中遷移進(jìn)入藥物產(chǎn)品或工藝流體中的化學(xué)物質(zhì)。浸出物可能是可提取物的一個(gè)子集，也可能包括可提取物的反應(yīng)或降解后產(chǎn)物。
 

　　(15)模型溶劑：與實(shí)際藥品成分的物理、化學(xué)性質(zhì)相同或相似的萃取溶劑。實(shí)際藥品的pH、合適濃度的有機(jī)溶劑和有機(jī)溶質(zhì)均為模型溶劑選擇的依據(jù)。
 

　　(16)起泡點(diǎn)：氣體從被充分潤濕的多孔濾膜中的大膜孔擠出并形成連續(xù)穩(wěn)定或大量的氣體時(shí)所需要的小壓力。
 

　　(17)擴(kuò)散流\前進(jìn)流：施加一個(gè)低于起泡點(diǎn)的氣體壓力，氣體分子通過充分潤濕的膜孔擴(kuò)散至濾膜下游的氣體流速。
 

　　(18)水侵入法測試：是在一定壓力下，測量干燥疏水性濾膜對水潤濕的抵抗力。即在低于水突破(水被壓通過)壓力下，測量少量但可測的液面下降所形成的“表觀”水流量。
 

　　(19)多批次連續(xù)生產(chǎn)：中間不清洗，不滅菌的連續(xù)運(yùn)行多批次的生產(chǎn)模式。
 

　　(20)終滅菌：對完成終密封的產(chǎn)品進(jìn)行滅菌處理，以使產(chǎn)品中微生物的存活概率(即無菌保證水平，SAL)不得高于10-6的生產(chǎn)方式。通常采用濕熱滅菌方法的標(biāo)準(zhǔn)滅菌時(shí)間F0值應(yīng)大于8分鐘。流通蒸汽處理不屬于終滅菌。
 

　　9 參考法規(guī)與指南
 

　　[1]《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》(2010年修訂)及附錄；
 

　　[2] PDA Technical Report No.40，Sterilizing Filtration of Gases；
 

　　[3] PDA Technical Report No.26 Revised 2008，Sterilizing Filtration of Liquids；
 

　　[4] USFDA Guidance for Industry，Sterile Drug Products Produced by Aseptic Processing-Current Good Manufacturing Practice，2004；
 

　　[5] EU Guidelines to Good Manufacturing Practice，Annex 1 Manufacture of Sterile Medicinal Products，2008。